歡迎您,來(lái)到青旗(上海)生物技術(shù)發(fā)展有限公司!
Related articles
簡(jiǎn)要描述:酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)用于做ELISA檢測(cè)的樣本應(yīng)首先離心除去沉淀物或懸浮物質(zhì)保證樣本澄清透明。為確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性,保證樣品不被降解,建議-20℃或-80℃保存的樣本在1-6個(gè)月內(nèi)完成檢測(cè),4℃保存的樣本在一周內(nèi)完成檢測(cè)。
更新時(shí)間:2021-07-20
廠(chǎng)商性質(zhì):生產(chǎn)廠(chǎng)家
瀏覽次數(shù):2904
品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅用于科研 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
一、 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)液體樣本:
1. 血清:PP管(不含熱原和內(nèi)毒素)收集全血,室溫自然凝固20-30分鐘,或4℃過(guò)夜,分離出血清,(適當(dāng)傾斜離心管以擴(kuò)大液面的橫截面,使血清能更大程度分離出來(lái))。4℃ 2000轉(zhuǎn)/分離心20-30分鐘,將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,收集上清,立即進(jìn)行測(cè)定。如暫不檢測(cè)可將收集的血清分裝保存于-20℃或-80℃,避免反復(fù)凍融,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血清樣本應(yīng)注意避免溶血和細(xì)菌污染。
2. 血漿:使用抗凝管或加入抗凝劑(EDTA、檸檬酸鈉或肝素)的PP管收集全血,混合10-20分鐘,4℃ 2000轉(zhuǎn)/分,離心20-30分鐘,收集上清,立即進(jìn)行測(cè)定,如暫不檢測(cè)可將收集的血清分裝保存于-20℃或-80℃,避免反復(fù)凍融。樣本應(yīng)避免溶血或高血脂。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液、胸腹水、腦脊液、母乳、唾液:用無(wú)菌管收集樣本,4℃ 2000轉(zhuǎn)/分,離心20-30分鐘。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
1) 胞外:無(wú)菌管收集,4℃ 2000轉(zhuǎn)/分,離心20-30分鐘,除去細(xì)胞碎片和雜質(zhì),收集上清液備用,樣本保存在-20℃或-80℃,避免反復(fù)凍融,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2) 胞內(nèi):加入裂解液,或用pH7.2-7.4的PBS稀釋細(xì)胞懸液,使細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右,通過(guò)反復(fù)凍融(如果反復(fù)凍融,破碎效果不好,可采用超聲波破碎),使細(xì)胞膜破壞并釋放出細(xì)胞內(nèi)成分,2000轉(zhuǎn)/分,離心20-30分鐘,收集上清。
二、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)固體樣本:
1. 組織標(biāo)本:標(biāo)本采集后用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。使用時(shí)切割標(biāo)本,稱(chēng)取1g左右組織,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。4℃ 2000轉(zhuǎn)/分,離心20分鐘,仔細(xì)收集上清。分裝一份待檢測(cè),其余冷凍備用,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2. 植物標(biāo)本:取0.1g新鮮植物組織樣本,液氮中充分研磨;加入樣品體積9倍的提取液(pH7.2-7.4左右的PBS),4℃ 8000轉(zhuǎn)/分離心30分鐘,取上清并暫時(shí)保存于4℃待用。如需精確提取,可在液氮研磨后加入1ml的提取液(80%甲醇), -20℃過(guò)夜后再4℃ 8000轉(zhuǎn)/分,離心1小時(shí),取上清;上清液過(guò)C-18固相萃取柱,過(guò)柱后的樣本真空干燥或氮?dú)獯蹈桑4鎮(zhèn)溆?;上樣前加入pH7.2-7.4左右的PBS緩沖液(1ml定容)?;靹蚝笫覝胤胖?0分鐘,4℃8000轉(zhuǎn)/分,離心15分鐘,取上清并暫時(shí)保存于4℃待用。
3. 土壤:稱(chēng)取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,充分混勻。4℃ 2000轉(zhuǎn)/分,離心20分鐘,仔細(xì)收集上清。分裝一份待檢測(cè),其余冷凍備用,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。