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JM108化學感受態(tài)細胞

JM108化學感受態(tài)細胞

簡要描述:JM108化學感受態(tài)細胞
JM108來源于JM106菌株,初是作為黏粒文庫的宿主被改造而成。 JM108菌株缺失核酸內(nèi)切酶 (endA),提高了質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量;重組酶缺陷型 (recA)減少插入片段的同源重組概率,保證了插入DNA 的穩(wěn)定性。JM108菌株大的特點是擴繁質(zhì)粒產(chǎn)量大,純度高,且質(zhì)量穩(wěn)定,特別是超螺旋質(zhì)粒比例較高。

更新時間:2022-01-20

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

瀏覽次數(shù):1252

詳情介紹
品牌其他品牌貨號BFNC86054
規(guī)格20x100ul/100x100ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途僅用于科研應用領域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

JM108化學感受態(tài)細胞



產(chǎn)品規(guī)格CAT#: BFNC86054-01(20×100ul)/BFNC86054-02(100×100ul)


JM108:                                                     100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                   10μl

保存條件(保質(zhì)期):                            -80℃(6個月)


基因型


F- endA1 recA1 gyrA96 thi-1 relA1 glnV44 Δ(lac-proAB) hsdR17 (rK- mK+)


產(chǎn)品說明

JM108來源于JM106菌株,初是作為黏粒文庫的宿主被改造而成。 JM108菌株缺失核酸內(nèi)切酶 (endA),提高了質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量;重組酶缺陷型 (recA)減少插入片段的同源重組概率,保證了插入DNA 的穩(wěn)定性。JM108菌株大的特點是擴繁質(zhì)粒產(chǎn)量大,純度高,且質(zhì)量穩(wěn)定,特別是超螺旋質(zhì)粒比例較高,超螺旋質(zhì)粒所占比例一般>90%(gyrA96突變型說明JM108菌株的DNA-gyrase 基因被突變,導致拓撲異構酶Ⅱ的功能受影響,增加了超螺旋質(zhì)粒的比例),非常適合后續(xù)的動物細胞轉(zhuǎn)染實驗(超螺旋質(zhì)??商岣呒毎D(zhuǎn)染的效率)。此外該菌株具有萘啶酸抗性。

青旗生物開發(fā)的JM108感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>0.5×109 cfu/μg DNA。


JM108化學感受態(tài)細胞



操作方法

1. JM108感受態(tài)細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)粒或連接產(chǎn)物)并用手bo打EP管底混勻,冰中靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。

3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇70分鐘。

4. 5000 rpm離心1分鐘收集菌體,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的培養(yǎng)基上。

5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱至少13小時。





注意事項

1. 感受態(tài)細胞盡量在冰中緩慢融化。插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。

2. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應減少終用于涂板的菌量。




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