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PEG/LiAc配套試劑

PEG/LiAc配套試劑

簡要描述:PEG/LiAc配套試劑
PEG/LiAc是青旗生物生產(chǎn)的酵母感受態(tài)細胞轉(zhuǎn)化所必需的配套試劑,每個轉(zhuǎn)化反應(yīng)需要500 µl PEG/LiAc。

更新時間:2022-01-21

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

瀏覽次數(shù):1565

詳情介紹
品牌其他品牌貨號BFNC86200
規(guī)格5ml/支/50ml/瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途僅用于科研應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

PEG/LiAc配套試劑



產(chǎn)品規(guī)格


產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

保存

PEG/LiAC

BFNC86200-01

5 ml

4, 12個月

PEG/LiAC

BFNC86200-02

50 ml

4, 12個月


產(chǎn)品說明


 PEG是一種高分子聚合物,只有分子量達到3000左右的PEG才會發(fā)揮大的轉(zhuǎn)化促進作用。

酵母感受態(tài)細胞轉(zhuǎn)化所需PEG分子量為4000,可促進酵母轉(zhuǎn)化效率達到103-105 cfu/μgDNA。PEG在酵母轉(zhuǎn)化中起到在高濃度LiAc環(huán)境中保護細胞膜,減少LiAc對細胞膜結(jié)構(gòu)損傷的作用;同時PEG可促使質(zhì)粒更緊密貼附酵母細胞壁。LiAc可使酵母細胞產(chǎn)生一種短暫的感受性狀態(tài),此時酵母能夠攝取外源性DNA

PEG/LiAc配套試劑是青旗生物生產(chǎn)的酵母感受態(tài)細胞轉(zhuǎn)化所必需的配套試劑,每個轉(zhuǎn)化反應(yīng)需要500 µl PEG/LiAc。


操作方法


1. Carrier DNA 在每次使用前要通過加熱處理使其變性為單鏈狀態(tài),步驟如下:Carrier DNA 95℃水浴或金屬浴3 min,快速插入冰中,靜置3 min,再次放95℃水浴或金屬浴3 min,快速插入冰中,靜置3 min以上。

2. 100 µl冰上融化的酵母感受態(tài)細胞,依次加入預(yù)冷的目的質(zhì)粒2-5 µg,Carrier DNA 10 µl,PEG/LiAc 500 µl并吸打幾次混勻,30℃水浴30 min (15 min時翻轉(zhuǎn)6-8次混勻)。

3. 將管放42℃水浴15 min (7.5 min時翻轉(zhuǎn)6-8次混勻)

4. 5000 rpm離心 40 s棄上清,ddH2O 400 µl 重懸,離心 30s棄上清。

5. ddH2O 50 µl重懸,涂板,29℃培養(yǎng)48-96 h。


注意事項


1. PEG長時間靜置易沉淀,在每次使用前務(wù)必搖晃,使試劑中各組分分布均勻。

2. PEG/LiAC 可在4℃長時間保存




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