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INVSc1感受態(tài)細(xì)胞

INVSc1感受態(tài)細(xì)胞

簡(jiǎn)要描述:INVSc1感受態(tài)細(xì)胞
INVSc1菌株是專門用來(lái)做重組蛋白表達(dá)的宿主酵母,pYES2質(zhì)粒與INVSc1酵母配套使用,激活pYES2質(zhì)粒的GAL1啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄進(jìn)而啟動(dòng)下游重組蛋白的表達(dá)。INVSc1為合子型,可直接通過PEG/LiAc將pYES2質(zhì)粒轉(zhuǎn)化進(jìn)入INVSc1細(xì)胞內(nèi)。質(zhì)粒pYES2的篩選標(biāo)志為URA,可用SD-URA板進(jìn)行篩選。

更新時(shí)間:2022-01-20

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

瀏覽次數(shù):1198

詳情介紹
品牌其他品牌貨號(hào)BFNC86061
規(guī)格10x100ul/50x100ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途僅用于科研應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

INVSc1感受態(tài)細(xì)胞



產(chǎn)品規(guī)格CAT#: BFNC86061-01(10×100ul)/BFNC86061-02(50×100ul)

INVSc1 Competent Cell:                                      100μl/支              保存: -80℃(3個(gè)月)


pYES2 (control vector, 10 ng/μl)                              10μl               保存:-80℃(12個(gè)月)

Carrier DNA (10 μg/μl)                                             100μl              保存:-20℃(12個(gè)月)

PEG/LiAC:                                                                    5ml              保存:    4℃(12個(gè)月)


基因型

MATa his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52/MATα his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52


產(chǎn)品說明

INVSc1菌株是專門用來(lái)做重組蛋白表達(dá)的宿主酵母,pYES2質(zhì)粒與INVSc1酵母配套使用,激活pYES2質(zhì)粒的GAL1啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄進(jìn)而啟動(dòng)下游重組蛋白的表達(dá)。INVSc1為合子型,可直接通過PEG/LiAc將pYES2質(zhì)粒轉(zhuǎn)化進(jìn)入INVSc1細(xì)胞內(nèi)。質(zhì)粒pYES2的篩選標(biāo)志為URA,可用SD-URA板進(jìn)行篩選。

青旗生物的INVSc1感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,-80℃可保存三個(gè)月,pYES2質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>104 cfu/μg DNA。


INVSc1感受態(tài)細(xì)胞


操作方法

1. 取100 µl冰上融化的INVSc1感受態(tài)細(xì)胞,依次加入預(yù)冷的目的質(zhì)粒2-5 µg,Carrier DNA (95-100℃,5 min,快速冰浴,重復(fù)一次) 10 µl,PEG/LiAc 500 µl并吸打幾次混勻,30℃水浴30 min (15 min時(shí)翻轉(zhuǎn)6-8次混勻)。

2. 將管放42℃水浴15 min (7.5 min時(shí)翻轉(zhuǎn)6-8次混勻)。

3. 5000 rpm離心 40 s棄上清,ddH2O 400 µl 重懸,離心 30s棄上清。

4. ddH2O 50 µl重懸,涂質(zhì)粒篩選用:SD-U medium板,29℃培養(yǎng)48-96 h。






注意事項(xiàng)


1. 感受態(tài)細(xì)胞盡量在冰上融化。

2. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳?yīng)減少終用于涂板的菌量。

3. INVSc1酵母菌株對(duì)高溫敏感,適生長(zhǎng)溫度為27-30℃;高于31℃,生長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)化效率呈指數(shù)下降。




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